標題:
乙型肝炎病毒表面抗原檢測
(
ELISA
)
版本號:
A
修訂號:
01
文件編號:
001
發布日期:
2011
年
11
月
30
日
生效日期:
2011
年
11
月
30
日
發布部門:管理層
編制人:
審核人:
批準人:
12
乙型肝炎病毒表面抗原檢測(
ELISA
)
1
原理:
在微孔板上預包被被純化的乙肝表面抗體
(
HBsAb
)
,
配
以酶標記抗體
(
HbsAb-HRP
)
及
TMB
等其它試劑,
采用夾
心法原理檢測人血清(或血漿)中乙肝表面抗原(
HBsAg
)
。
2
試劑:
2.1
試劑名稱:乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒(酶聯
免疫法)
2.2
試劑生產廠家:英科新創(廈門)科技有限公司
2.3
包裝規格:
96Test/Kit
2.4
試劑盒組成:
HbsAb
預包被微孔板(包被
HbsAb
)
,
HbsAg
酶標抗體(含
HRP
標記
HbsAb
)
,
HbsAg
陽性對
照
(含基因工程
HbsAg
)
,
HbsAg
陰性對照
(正常人血清)
,
HbsAg
樣品稀釋液(含
BSA
緩沖液)
,濃縮洗滌液(
PBS-T
緩沖液)
,底物
A
(含
H2O2
)
,底物
B
(含
TMB
)
,終止液
(含
H2SO4
)
,封板膜,自封袋,說明書。
2.5
試劑儲存條件及有效期:
2~8
℃避光保存,有效
12
個月。
3
樣本采集:
取靜脈血
3-4ml
于干凈容器中分離出血清或血漿標本,
如不及時測定可置于
4
℃冰箱保存,如長期保存需置于
-15
至
-20
℃凍存,并避免樣本反復凍融。高脂血、高膽紅素及
標題:
乙型肝炎病毒表面抗原檢測
(
ELISA
)
版本號:
A
修訂號:
01
文件編號:
001
發布日期:
2011
年
11
月
30
日
生效日期:
2011
年
11
月
30
日
發布部門:管理層
編制人:
審核人:
批準人:
13
溶血樣本可能會影響試驗結果的準確性,建議不使用。
4
所需儀器
4.1
全自動酶免分析儀
4.2
新鮮蒸餾水或去離子水
4.3
酶標儀(單波長
450nm
或雙波長
450nm/630nm
)
4.4
微量移液器
4.5 37
℃恒溫箱或水浴箱
4.6
洗板機或洗瓶
5
檢驗方法
5.1
平衡:將試劑盒各組分從盒中取出,平衡至室溫
(
18~25
℃)
,微孔板板開封后,余者即時以自封袋封存。
5.2
配液:濃縮洗滌液配置前充分搖勻(如有晶體應充分
溶解)
,
濃縮洗滌液和蒸餾水去離子水按
1
:
19
稀釋后使用。
5.3
編號:取所需數量微孔條固定于支架,按序編號。
5.4
稀釋:每孔加入
20ul
樣品稀釋液。
5.5
加樣:分別在相應孔中加入
100ul
陰、陽性對照血清
或待測樣本。
5.6
溫育:置
37
℃溫育
60min
。
5.7
加酶:分別在每孔中加入酶標記抗體
50ul
。
5.8
溫育:置
37
℃溫育
30min
。
5.9
洗滌:用洗滌液充分洗滌
5
次、洗滌后扣干(每次應
保持
30~60s
的浸泡時間)
。